pankart

Nuklein turşusunun çıxarılması texnologiyasının təqdimatı

Nuklein turşusuigiriş

Nuklein turşusu deoksiribonuklein turşusu (DNT) və ribonuklein turşusuna (RNT) bölünür, bunlar arasında RNT müxtəlif funksiyalarına görə ribosomal RNT(rRNA), xəbərçi RNT(mRNA) və transfer RNT(tRNA) bölünür.DNT əsasən nüvədə, mitoxondriyada və xloroformda, RNT isə əsasən sitoplazmada paylanır.Gen ifadəsinin maddi əsası olaraq, nuklein turşusunun çıxarılması molekulyar biologiya tədqiqatında və klinik molekulyar diaqnostikada son dərəcə mühüm rol oynayır.Nuklein turşusunun çıxarılmasının konsentrasiyası və saflığı birbaşa sonrakı PCR, ardıcıllıq, vektor quruluşu, fermentlərin həzm edilməsi və digər təcrübələrə təsir edəcəkdir.

 Nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənməsi üsulu 

① Fenol/xloroformun çıxarılması üsulu

Fenol/xloroform ekstraksiyası, nümunələri müalicə etmək üçün əsasən iki müxtəlif üzvi həlledicidən istifadə edən, su fazasında DNT əsaslı nuklein turşusunu, üzvi fazada lipidləri və iki faza arasında zülalları həll edən DNT ekstraksiyasının klassik üsuludur.Bu üsul aşağı qiymət, yüksək təmizlik və yaxşı təsir üstünlüklərinə malikdir.Dezavantajlar mürəkkəb əməliyyat və uzun müddətdir.

② Trizol üsulu

Trizol metodu RNT çıxarılması üçün klassik üsuldur.Trizol üsulu xloroform ilə sentrifuqadan sonra sulu faza və üzvi fazaya bölünür, burada RNT sulu fazada həll edilir, sulu faza yeni EP borusuna köçürülür, izopropanol əlavə edildikdən sonra çöküntü əldə edilir, sonra etanolun təmizlənməsi.Bu üsul heyvan toxumalarından, hüceyrələrindən və bakteriyalardan RNT çıxarılması üçün uygundur.

③ Mərkəzdənqaçma sütununun təmizlənməsi üsulu

Santrifüj sütununun təmizlənməsi üsulu DNT-ni xüsusi silikon matriks adsorbsiya materialları vasitəsilə adsorbsiya edə bilər, RNT və zülal isə rəvan keçə bilər və sonra nuklein turşusunu ayırmaq və təmizləmək üçün nuklein turşusu, aşağı duz yüksək PH dəyərli elüsyonu birləşdirmək üçün yüksək duzlu aşağı PH istifadə edin.Üstünlükləri yüksək təmizlənmə konsentrasiyası, yüksək sabitlik, üzvi həllediciyə ehtiyac olmaması və aşağı qiymətdir.Dezavantaj ondan ibarətdir ki, onu addım-addım, daha çox əməliyyat addımları ilə sentrifuqa etmək lazımdır.

fiytjt (1)

④ Maqnit muncuq üsulu

Maqnit muncuq üsulu hüceyrə toxuması nümunəsini lizat vasitəsilə parçalamaq, nümunədəki nuklein turşusunu buraxmaq və sonra nuklein turşusu molekulları xüsusi olaraq maqnit muncuqunun səthinə adsorbsiya edilir, zülallar və şəkərlər kimi çirklər isə maqnit muncuqunun səthində qalır. maye.Hüceyrə toxumasının parçalanması, maqnit muncuqunun nuklein turşusu ilə bağlanması, nuklein turşusunun yuyulması, nuklein turşusunun elüsyonu və s. addımları vasitəsilə nəhayət, saf nuklein turşusu əldə edilir.Üstünlüklər sadə əməliyyat və pilləli sentrifuqaya ehtiyac olmadan qısa müddətdə istifadədir.Aşağı texniki tələblərə malikdir və avtomatik və kütləvi əməliyyatı həyata keçirə bilir.Maqnit muncuq və nuklein turşusunun spesifik birləşməsi ekstraksiya edilmiş nuklein turşusunu yüksək konsentrasiya və saflıq ilə təmin edir.Mənfi cəhət odur ki, hazırkı bazar qiyməti nisbətən bahadır.

fiytjt (2)

⑤ Digər üsullar

Yuxarıda göstərilən dörd üsuldan əlavə, qaynar krekinq, qatılaşdırılmış duz üsulu, anion yuyucu üsul, ultrasəs üsulu və fermentativ üsul və s.

 Nuklein turşusunun çıxarılması növü

Foregene dünyanın aparıcı Direct PCR platformasına, iki sütunlu RNT İzolyasiya platformasına (yalnız DNT + yalnız RNT) malikdir.Əsas məhsullara DNT/RNT izolyasiya dəstləri, PCR və birbaşa PCR reagentləri molekulyar laboratoriya reagentləri daxildir.

① Ümumi RNT ekstraksiyası

Ümumi RNT ekstraksiya nümunələrinə qan, hüceyrələr, heyvan toxumaları, bitkilər, viruslar və s. daxildir. Ümumi RNT-nin yüksək saflığı və yüksək konsentrasiyası RT-PZR, çip analizi, in vitro tərcümə, molekulyar klonlaşdırma, Dot Blot və digər təcrübələr.

Xarici ilə əlaqəliRNT izolyasiya dəstləri

fiytjt (3)

Heyvanların Ümumi RNT İzolyasiya Kiti--Müxtəlif heyvan toxumalarından yüksək təmizlik və yüksək keyfiyyətli ümumi RNT-ni tez və səmərəli şəkildə çıxarın.

fiytjt (4)

Hüceyrə Toplam RNT İzolyasiya Kiti--Müxtəlif becərilmiş hüceyrələrdən 11 dəqiqə ərzində yüksək təmizlənmiş və yüksək keyfiyyətli ümumi RNT əldə etmək olar.

fiytjt (5)

Bitki Ümumi RNT İzolyasiya Kiti--Aşağı polisaxarid və polifenol tərkibli bitki nümunələrindən yüksək keyfiyyətli ümumi RNT-ni sürətlə çıxarın.

fiytjt (6)

Viral RNT İzolyasiya Kiti--Viral RNT-ni plazma, serum, hüceyrəsiz bədən mayeləri və hüceyrə mədəniyyətinin supernatantları kimi nümunələrdən sürətlə təcrid edin və təmizləyin.

② Genomik DNT çıxarılması

Genomik DNT ekstraksiya nümunələrinə torpaq, nəcis, qan, hüceyrələr, heyvan toxumaları, bitkilər, viruslar və s. daxildir. Genomik DNT çıxarılması fermentlərin həzmində, DNT kitabxanasının qurulmasında, PCR, antikorların hazırlanmasında, Western blot hibridləşmə analizində, gen çipi, yüksək -keçirmə ardıcıllığı və digər təcrübələr.

Xarici ilə əlaqəliDNT İzolyasiya Kitləri

fiytjt (7)

Heyvan toxuması DNT izolyasiya dəsti--Heyvan toxumaları, hüceyrələr və s. kimi çoxsaylı mənbələrdən genomik DNT-nin sürətli çıxarılması və təmizlənməsi.

fiytjt (8)

Qan DNT Midi Kit (1-5ml)--Yüksək keyfiyyətli genomik DNT-ni antikoaqulyasiya edilmiş qandan (1-5ml) tez təmizləyin.

fiytjt (9)

Bukkal Swab/FTA Kartı DNT İzolyasiya Kiti--Bukkal tampon/FTA Kart nümunələrindən yüksək keyfiyyətli genomik DNT-ni tez bir zamanda təmizləyin.

fiytjt (10)

Bitki DNT İzolyasiya Kiti- Bitki nümunələrindən (polisaxaridlər və polifenol bitki nümunələri daxil olmaqla) yüksək keyfiyyətli genomik DNT-ni tez bir zamanda təmizləyin və əldə edin.

③ Plazmid çıxarılması

Plazmid, DNT rekombinasiyası üçün ümumi daşıyıcı olan hüceyrələrdəki bir növ dairəvi kiçik molekul DNT-dir.Plazmidin çıxarılması üsulu RNT-ni çıxarmaq, plazmidi bakteriya genomik DNT-dən ayırmaq və nisbətən təmiz plazmid əldə etmək üçün zülal və digər çirkləri çıxarmaqdır.

fiytjt (11)

Ümumi Plasmid Mini Kit- Transformasiya və fermentlərin həzmi kimi adi molekulyar biologiya təcrübələri üçün yüksək keyfiyyətli plazmid DNT-ni transformasiya olunmuş bakteriyalardan tez təmizləyin

④ Digər ekstraksiya növləri, miRNT çıxarılması və s.

fiytjt (12)

Heyvan miRNA İzolyasiya Kiti--Müxtəlif heyvan toxumalarından və hüceyrələrindən 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA-nın kiçik RNT fraqmentlərini tez və səmərəli şəkildə çıxarın

 Nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənməsi nəticəsi üçün tələblərs

① Nuklein turşusunun ilkin strukturunun bütövlüyünü təmin etmək.

② Zülalların, şəkərlərin, lipidlərin və digər makromolekulların müdaxiləsini azaldır

③ Nuklein turşusu nümunələrində fermenti maneə törədə bilən üzvi həlledici və ya yüksək konsentrasiyalı metal ionları olmamalıdır.

④ DNT çıxararkən RNT və digər nuklein turşusu ilə çirklənmə aradan qaldırılmalıdır və əksinə.

 


Göndərmə vaxtı: 24 noyabr 2022-ci il
naviqasiya_ikonası